殘留DNA樣品制備試劑盒從中提取宿主細(xì)胞DNA細(xì)胞系中產(chǎn)生的產(chǎn)物,如CHO,大腸桿菌,人類(lèi),Vero,畢赤酵母,NS0和MDCK。該試劑盒使用化學(xué)裂解和磁珠有效提取基因組來(lái)自不同樣品類(lèi)型的DNA,包括含有高蛋白和低蛋白的樣品DNA濃度。
適合提取<100bp的DNA碎片
懸浮分散性佳的磁珠增加接觸DNA的幾率,從而更好地提取目的DNA
非特異性RNA的加入減少目的基因的非特異性損失
配套恒溫渦旋振蕩器可取得更加的DNA提取效果
優(yōu)質(zhì)的蛋白酶K提供優(yōu)良的蛋白裂解效果
高純度的DNA樣品利于后期的qPCR檢測(cè)
采用去蛋白抑制劑的步驟,利于高濃度蛋白樣品的qPCR
細(xì)胞表達(dá)的生物制品, 包括單抗藥物、細(xì)胞治療和疫苗, 新藥申報(bào)需要對(duì)宿主表達(dá)細(xì)胞的殘留DNA進(jìn)行定量。 這類(lèi)的生物制品痕量DNA通常在pg級(jí)水平, 而行業(yè)規(guī)范回收率達(dá)到70-130%才算合格,市場(chǎng)上大部分的DNA提取試劑都不合格,只有幾家試劑供應(yīng)商合格。 問(wèn)題的難點(diǎn)在于1)如何增加DNA提取的效率?2)如何解決高濃度蛋白的PCR擴(kuò)增干擾?3)如何盡可能去除PCR抑制劑(除蛋白外)?4)如何解決乙醇干燥帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)間操作誤差?本DNA提取方法通過(guò)在經(jīng)典DNA提取方法上改進(jìn)了三個(gè)步驟:1)蛋白促溶步驟;2)旋轉(zhuǎn)混勻;3)去除PCR抑制劑步驟。從而解決了上述的4個(gè)問(wèn)題。
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