超微量紫外分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。儀器對于一般的分光光度法,其濃度測量的相對誤差在1~3%范圍內,如采用示差分光光度法進行測量,則誤差可減少到0.1%。
什么是光度重復性?
儀器冷態(tài)開機,預熱0.5h后,對標準樣品或使用者自選的樣品進行光譜掃描,而后在譜圖上選擇幾個特征吸收峰,檢查在選定的測量次數(shù)內,各個峰值的之差即為光度重復性。
影響光度重復性的主要因素
影響超微量紫外分光光度計光度重復性的主要因素有以下幾種。
1、光源系統(tǒng)
光源系統(tǒng)即指燈泡和電源,如果氘燈或鎢燈燈泡本身的質量不好,即使電源很好,氘燈或鎢燈發(fā)出的光通量肯定不穩(wěn)。這樣,分光光度計就不可能得到好的、穩(wěn)定的測試結果。如果氘燈或鎢燈的燈泡很好,但其電源不穩(wěn),那么光源系統(tǒng)(燈泡)發(fā)出的光通量也不可能穩(wěn),也不可能得到好的光度重復性。
2、光電轉換器系統(tǒng)
光電轉換器系統(tǒng)包括光電轉換元件及其供電電源,光電轉換元件是將光信號轉換成電信號的關鍵元件。不管分光光度計的其他元部件多好,如果光電轉換元件不好,就不可能得到好的光度重復性。
3、如果光電轉換元件很好,其供電電源不好,電源一直在波動或漂移,也不可能得到好的光度重復性。因此,超微量紫外分光光度計的制造者和使用者一定要高度重視光電轉換器系統(tǒng)對光度重復性的影響。